2023年第65届美国血液学会（ASH）年会已圆满闭幕。作为全球血液病领域的权威学术盛会，ASH年会上呈现的学术报告代表了血液病领域的最重要及前沿的研究成果。在本次大会上，河北燕达陆道培医院、北京陆道培血液病研究院王彤教授的一项研究入选壁报展示，该研究探讨了急性淋巴细胞白血病（ALL）JAK2基因重排产生融合基因（FGs）及髓系累及情况，以促进临床对JAK2-FGs阳性ALL的临床特点、治疗和预后等的深入认识。
编者按：2023年第65届美国血液学会（ASH）年会已圆满闭幕。作为全球血液病领域的权威学术盛会，ASH年会上呈现的学术报告代表了血液病领域的最重要及前沿的研究成果。在本次大会上，河北燕达陆道培医院、北京陆道培血液病研究院王彤教授的一项研究入选壁报展示，该研究探讨了急性淋巴细胞白血病（ALL）JAK2基因重排产生融合基因（FGs）及髓系累及情况，以促进临床对JAK2-FGs阳性ALL的临床特点、治疗和预后等的深入认识。
研究背景
JAK2基因重排产生融合基因（FGs）在髓系或淋巴系恶性肿瘤各亚型中均非常少见，世界卫生组织血液淋巴肿瘤分类第五版（WHO-HAEM5，PMID:35732831）以及国际共识分类（2022）（ICC，PMID:35767897），都将JAK2-FGs纳入了髓系/淋系肿瘤伴嗜酸粒细胞增多和酪氨酸激酶基因融合（MLN-TK或MLN-eo）的诊断实体，ICC特别强调，在以M/LN-TK为特征的急性淋巴细胞白血病（ALL）中，与Ph-like B-ALL和原发T-ALL相比，遗传学异常不仅累及淋系原始细胞，而且累及背景中的髓系细胞。目前缺乏JAK2-FG阳性ALL的研究报道，以及异常累及髓系细胞对治疗和预后影响等的相关研究报道。
研究方法
本研究纳入21例ALL患者（表1）。通过G带染色体核型分析、转录组测序（RNA-seq;PMID:34135310）、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和间期荧光原位杂交（I-FISH）联合应用JAK2分离探针来确定是否存在JAK2-FGs阳性，同时进行了基因突变分析（PMID:29932212）。根据在粒系杆状核细胞和分叶核细胞中是否出现FISH-JAK2分离信号（图1A），将这些病例分为My+组（有粒系参与）和My-组（无粒系参与），比较了这两组患者对治疗的反应及预后。
研究结果
本研究队列中男性14例，女性7例（男：女=2：1）；B-ALL 15例，T-ALL 6例；中位年龄为22岁（范围5～55岁）。所有病例的RNA-seq分析均为JAK2-FGs阳性，所有FGs均经RT-PCR和Sanger测序验证。共检测到16个JAK2伙伴基因（表1，图1B/C），其中FNBP1、CDK5RAP2、GTF2I、C14orf 93等基因此前未见文献报道。所有病例都保留了JAK2基因的完整激酶结构域，13例病例在其JAK2-FGs中保留了部分或全部JAK2伪激酶结构域。检出核型异常17例（81%），9p24异常10例（48%），9p24以外异常7例，核型正常4例。FISH-JAK2检测在20例中显示分离信号，在第21例患者中显示阴性结果，该病例具有复杂的异常核型。
12例病例（12/20=60%）在圆形核、杆状核和分叶核中显示JAK2分离信号（表1，My+组），提示涉及淋巴和髓系两种谱系。我们进一步研究了4例诱导化疗后形态完全缓解时的骨髓样本，其淋巴母细胞免疫表型分析也为阴性，FISH-JAK2检测显示分离信号占细胞核的13%～79%，在杆状/叶状核中有分离信号，RT-PCR也证实在这些样本中有丰富的JAK2-FG转录本。
My+组有8例B-ALL和4例T-ALL，其中2例T-ALL同时伴有STIL::TAL1融合基因阳性，3例在病程中出现嗜酸性粒细胞增多（表1）；5例JAK2伙伴基因为淋巴细胞发育相关转录因子（如ETV6，PAX5等）的病例均在My-组，My-组所有病例和#21均无嗜酸性粒细胞增多的记录。
本队列21例患者中，13例诊断时白细胞计数>50×109/L，无明显肝脾肿大。总随访时间为2～89个月，中位总生存期（OS）为17个月。14例患者接受了异基因造血干细胞移植（HSCT），HSCT组中位OS为29.5个月，非HSCT组中位OS为9个月。My+组中位OS为155个月，My-组中位OS为29个月。这些病例的白血病细胞易处于高速增殖状态，一般生存期短，预后差。
研究结论
本研究中，髓系受累占JAK2-FGs阳性ALL的60%，My+病例比My-病例预后更差，OS更短。I-FISH检查可作为确定是否有髓系受累的方法，为准确分析提供有价值的信息。JAK2-FGs在ALL中的发生率较低，但融合伙伴多种多样，这组病例有可能存在有更多的隐匿性JAK2易位，预后不佳。JAK2-FG恶性肿瘤的表型是由多因素共同决定的，受伙伴基因、伴随融合基因、伴随突变基因的影响。
研究者说
髓系/淋系肿瘤伴嗜酸粒细胞增多和酪氨酸激酶基因融合（MLN-TK）这一实体亚型，是由酪氨酸激酶基因重排而驱动的髓系或淋系肿瘤，重排产生的融合产物使酪氨酸激酶域持续活化，导致细胞信号传导紊乱，促进了细胞持续增殖和生存。第五版WHO将JAK2-FGs正式纳入这一实体。JAK2基因突变相对多见，但相关融合基因非常少见，且可能多为隐匿性易位，常规方法检出率低，因此缺乏JAK2-FGs的大量报道，尤其是伴JAK2-FGs的ALL，缺乏对其诊断和鉴别诊断，临床特点、治疗和预后等的深入认识。
联合采用染色体核型分析、FISH-JAK2分离探针、转录组测序、RT-PCR以及基因突变分析等方法检出21例伴JAK2-FGs的ALL患者，通过对21例伴JAK2-FGs ALL患者的分析，识别出16个JAK2伙伴基因，其中4个伙伴基因（FNBP1、CDK5RAP2、GTF2I、C14orf 93）未见文献报道，伙伴基因对肿瘤表型的影响，有待进一步深入分析；采用FISH-JAK2分离探针对ALL患者骨髓涂片或制备的染色体悬液中的背景细胞（主要包括杆状核、分叶核细胞）进行荧光信号分析，发现约60%的JAK2-FGs阳性ALL患者髓系细胞呈现阳性信号，进一步分析治疗和预后转归，发现髓系受累患者较未受累患者预后差，生存期短，其机制也有待进一步深入研究和分析；I-FISH同时分析白血病细胞及其背景细胞，是确定是否有髓系受累的有效方法，能为准确分析提供有价值的实验依据。
通讯作者
刘红星
北京陆道培血液病研究院执行院长；陆道培医院病理和检验医学科主任
从事血液病实验诊断及相关研究工作，以通讯/第一作者发表学术论文130余篇。
第七届北京优秀医师；中国非公立医疗机构协会病理专委会常委兼血液病学组组长、中国医药卫生文化协会实验诊断与社会化服务专委会常委、中国抗癌协会肿瘤基因诊断专委会委员/临床检验与伴随诊断专委会委员/肿瘤疫苗专委会委员、北京非公立医疗机构协会检验专委会副主任委员、北京免疫学会理事、北京医学检验学会理事等；《中华医学杂志》通讯编委；《白血病•淋巴瘤》、《分子诊断与治疗杂志》、International Journal of Medical Reviews编委。
第一作者
王彤教授
临床医学研究研究员
陆道培医疗集团细胞和分子细胞遗传学实验室主任
中国抗癌协会血液肿瘤血液病理学组专家委员会委员
中国医师协会检验医师分会造血与淋巴肿瘤检验医学专委会特聘专家
北京医学检验学会理事
北京医学检验学会血液学和体液学检验分会常务委员
中国中西医结合学会检验医学专业委员会委员
白求恩精神研究会检验医学分会常务理事、高级顾问
中国医药质量管理协会医学检验质量管理专业委员会血液病实验诊断质量管理学组常务委员
从事血液肿瘤细胞遗传学研究及临床工作30余年；参与《临床血液学检验》等多本专业书籍的编写；参与《血液病细胞-分子细胞遗传学诊断技术中国专家共识》等专家共识的制定；近年来研究论文发表于Cancer Gene Therapy等杂志，并多次被ASH、EHA、JSH等收录为大会壁报展示或口头发言。
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